Kit Ekstraksi DNA Genomik Tanaman

 

Nama Produk	Kucing.Tidak.	Spesifikasi.
Kit Ekstraksi DNA Genomik Tanaman	G3634-50T	50T

 

 

Melalui penggunaan teknologi kolom adsorpsi sentrifugal dan sistem buffer lisis unik, kit ini dapat mengekstraksi DNA genom dari berbagai jenis jaringan tanaman sederhana dengan aman, cepat, dan efisien. Setelah penggilingan lengkap dengan nitrogen cair, sampel tanaman sepenuhnya tercampur dengan lisat, yang dapat dengan cepat melepaskan DNA genom, dan operasi ekstraksi hanya selesai dalam waktu 1 jam. Kit ini dapat mengekstraksi dan memurnikan 1~10 ug DNA genom dari 50~100 mg jaringan tanaman. DNA genom yang diekstraksi dapat digunakan dalam amplifikasi PCR, pencernaan restriksi endonuklease, hibridisasi Selatan, RAPD, AFLP, RFLP dan eksperimen biologi molekuler konvensional lainnya.

 

 

RNase A dikirimkan dengan es basah dan disimpan pada suhu -20 derajat . Reagen lainnya dikirim dan disimpan pada suhu kamar; berlaku hingga 12 bulan.

 

 

Nomor Komponen	Komponen	G3634-50T
G3634-1	Penyangga PGL1	25ml
G3634-2	Penyangga PGL2	7 ml
G3634-3	Penyangga PD	9ml
G3634-4	Penyangga PW	24ml
G3634-5	RNase A	350 μL
G3634-6	Kolom Putaran DNA	50个
G3634-7	Tabung koleksi	50个
G3634-8	Penyangga TE	15ml
petunjuk		Satu salinan

 

 

1. Sampel tanaman yang diawetkan dengan kriopreservasi harus menghindari pembekuan dan pencairan berulang kali, jika tidak, kualitas dan hasil DNA yang diekstraksi akan berkurang.

2. Jika Buffer PGL1 mengendap, harap panaskan pada suhu 65 derajat sebelum digunakan sampai endapan hilang, aduk rata dan gunakan.

3. Silakan tambahkan etanol anhidrat (seethebottle) ke Buffer PD dan Buffer PW sebelum digunakan.

 

 

1. Lisis jaringan tumbuhan:

A. Pindahkan dengan cepat 50~100 mg jaringan tanaman segar atau kriopreservasi ke dalam 2,0 mL tabung penggilingan Bebas RNase yang berisi 2~3 3 mm manik-manik (disarankan G0203-150G) dan didinginkan terlebih dahulu dengan nitrogen cair (direkomendasikan HT-200-M). Tempatkan tabung gerinda pada penggiling (direkomendasikan KZ-5F-3D) (dinginkan adaptor dengan cepat dalam nitrogen cair sebelum digunakan) hingga menjadi bubuk (jika belum sepenuhnya digiling menjadi bubuk, itu akan mempengaruhi hasil dan kualitas DNA). Kemudian tambahkan 400 μL Buffer PGL1 dan 6 μL RNase A ke dalam tabung penggilingan, gunakan pipet untuk meniup sampai tidak ada pengendapan yang terlihat jelas pada lisat, diamkan pada suhu kamar selama 10 menit.

B. Pindahkan dengan cepat 50~100 mg jaringan tanaman segar atau kriopreservasi ke dalam tabung sentrifugasi Bebas RNase 1,5 mL. Tambahkan nitrogen cair dan giling jaringan dengan alu, tambahkan nitrogen cair terus menerus hingga sampel digiling menjadi bubuk (jika tidak digiling seluruhnya menjadi bubuk akan mempengaruhi hasil dan kualitas DNA). Kemudian tambahkan 400 μL Buffer PGL1 dan 6 μL RNase A ke dalam tabung centrifuge, gunakan pipet cair untuk meniup sampai tidak ada pengendapan yang terlihat jelas pada lisat, dan diamkan pada suhu kamar selama 10 menit.

C. Pindahkan dengan cepat 50~100 mg jaringan tanaman segar atau kriopreservasi ke dalam mortar yang telah didinginkan sebelumnya dengan nitrogen cair. Tambahkan nitrogen cair dan giling jaringan dengan alu, tambahkan nitrogen cair terus menerus hingga menjadi bubuk (jika tidak sepenuhnya digiling menjadi bubuk akan mempengaruhi hasil dan kualitas DNA). Sampel bubuk ditambahkan ke dalam 1,5 mL tabung sentrifugasi bebas RNase yang mengandung 400 μL Buffer PGL1 dan 6 μL RNase A, gunakan pipet untuk meniup sampai tidak ada pengendapan yang jelas dalam lisat dan diamkan pada suhu kamar selama 10 menit.

2. Tambahkan 130 μL Buffer PGL2 ke dalam tabung centrifuge, aduk rata dengan pipet, dan letakkan di atas es selama 5 menit.

3. Centrifuge pada 12,000 rpm selama 5 menit, pindahkan supernatan ke dalam tabung centrifuge baru.

4. Tambahkan Buffer PD dengan volume yang sama dengan supernatan ke dalam tabung centrifuge dan aduk hingga terbalik.

5. Tempatkan DNA Spin Column pada Collection Tube, dan pindahkan campuran ke DNA Spin Column. Setiap penambahan tidak melebihi 600 μL, jika melebihi dapat ditambahkan secara batch.

6. Sentrifugasi 12,000 rpm selama 30 detik dan buang filtratnya. Masukkan kembali Kolom Putar DNA ke dalam Tabung Pengumpul.

7. Tambahkan 600 μL Buffer PW ke dalam DNA Spin Column (tambahkan Buffer PW di sepanjang dinding pipa untuk membantu membilas sisa garam pada dinding pipa), dan sentrifugasi dengan kecepatan 12,000 rpm selama 30 detik, lalu buang filtratnya .

8. Ulangi langkah 7.

9. Masukkan DNA Spin Column ke dalam Collection Tube, sentrifugasi pada 12,000 rpm selama 2 menit.

10. Pindahkan Spin Column ke tabung centrifuge 1,5 mL bebas Nuklease yang baru. diamkan pada suhu kamar selama 3~5 menit, agar sisa etanol Spin Column dapat menguap seluruhnya.

11. Tambahkan 50~100 μL Buffer TE atau Air Bebas Nuklease ke dalam tabung centrifuge, diamkan pada suhu kamar selama 5 menit (pemanasan Buffer TE atau Air Bebas Nuklease hingga 65 derajat bermanfaat untuk meningkatkan efisiensi elusi).

12. Centrifuge dengan kecepatan 12,000 rpm selama 2 menit untuk mengumpulkanDNA. Untuk mendapatkan konsentrasi DNA yang lebih tinggi, Anda juga dapat menambahkan kembali eluen pertama ke Kolom Putar DNA, kemudian diamkan pada suhu kamar selama 5 menit dan sentrifugasi selama 2 menit untuk mengumpulkan DNA kembali.

 

 

1. Coba gunakan jaringan tanaman segar untuk memastikan hasil dan integritas DNA genom.

2. Untuk pengawetan jangka panjang, DNA yang diekstraksi harus dielusi dengan Buffer TE dan disimpan pada suhu -80 .

3. DNA genom yang diperoleh harus menghindari pembekuan dan pencairan berulang kali.

 

 

Hasil DNA genom yang diekstraksi dari berbagai sampel tanaman dengan kit ini ditunjukkan pada tabel di bawah. Hasil DNA genom terkait dengan spesies tanaman, organ, dan status pertumbuhan. Dosis sampel yang dianjurkan ditunjukkan pada tabel di bawah.

Mencicipi	Dosis	DNA menghasilkan
Daun Oryza sativa	50mg	5~10 Agustus
Daun Brassica napusL	50mg	4~8 Agustus
Daun Arabidopsis thaliana	80mg	0.5~1 Agustus
Daun Nicotiana tabacum	50mg	2~4 Agustus
Daun Lycopersicon esculentum	50mg	2~5 Agustus
Allium tuberosum Rottler ex daun Sprengle	50mg	3~6 Agustus
Daun ApiumgraveolensL	50mg	2~4 Agustus
Daun Epipremnum aureum	50mg	0.5~1 Agustus
Daun populus alba	50mg	1~2 Agustus
Brassica rapa var. daun regel glabra	50mg	1~2 Agustus

 

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

 

 

Tag populer: kit ekstraksi dna genom tanaman, produsen, pemasok, pabrik kit ekstraksi dna genom tanaman Cina