Pengenalan Produk
|
Nama Produk |
Kucing. TIDAK. |
Spesifikasi. |
|
SweScript All-in-One Blue RT SuperMix untuk qPCR (Penghilang gDNA Satu Langkah) |
G3329-50 |
50 rxns |
|
G3329-100 |
100 rxn |
Deskripsi/Pengenalan Produk
Produk ini mencakup 5×premix siap pakai (5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix untuk qPCR) dan reagen Penghilang gDNA yang dikembangkan secara khusus untuk sintesis cDNA rantai pertama, yang dapat menghilangkan residu genom templat sambil membalikkan transkripsi dilakukan. Selain itu dilengkapi dengan 5×SweScript All-in-One Blue No-RT Control SuperMix untuk qPCR, sebagai kontrol tanpa reverse transkriptase untuk menentukan apakah template qPCR berasal dari cDNA. Larutan yang telah dicampur sebelumnya mengandung semua reagen yang diperlukan untuk reaksi transkripsi balik (SweScript RT, RNase Inhibitor, Random Primer, Oligo (dT)18 Primer, dNTPs dan buffer yang dioptimalkan), serta pewarna pelacak biru, yang membantu mengurangi kesalahan pengambilan sampel dan menyediakan indikasi warna dan pelacak untuk qPCR berikutnya. SweScript RT adalah
transkriptase balik mutan yang diperoleh melalui skrining evolusioner in vitro, yang memiliki karakteristik stabilitas termal tinggi dan kemampuan sintesis berkelanjutan yang kuat. gDNA Remover mengandung DNase yang peka terhadap panas, yang 30 kali lebih aktif daripada DNaseⅠ, hanya bekerja pada dsDNA dan mudah dinonaktifkan pada suhu tinggi.
Kondisi Penyimpanan dan Penanganan
Kirim dengan es basah, simpan pada suhu -20 derajat ; berlaku selama 12 bulan.
Produk Isi
|
Nomor Komponen |
Komponen |
G3329-50 |
G3329-100 |
|
3329-1 |
5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix untuk qPCR |
200 µL |
400 µL |
|
3329-2 |
Penghilang gDNA |
50 µL |
100 µL |
|
3329-3 |
Air Bebas Nuklir |
1 ml |
1 ml |
|
3329-4 |
5×SweScript All-in-One Biru Tanpa RT Kontrol SuperMix untuk qPCR |
20 µL |
40 µL |
|
petunjuk |
Satu salinan |
Satu salinan |
|
pengujian Protokol / Prosedur
1. Sintesis cDNA untai pertama dan penghilangan gDNA
(1) Siapkan campuran reaksi (direkomendasikan sistem reaksi 20 μL)
|
Komponen |
Volume |
|
5×SweScript All-in-One Blue RT SuperMix untuk qPCR |
4 μL |
|
Penghilang gDNA |
1 μL |
|
Jumlah RNA/mRNA |
0.1 ng-5 ug/10 hal-0.5 ug |
|
Air Bebas Nuklir |
Tambahkan hingga 20 μL |
(2) Aduk perlahan dan sentrifugasi.
(3) Pengaturan program transkripsi terbalik:
|
Suhu |
Waktu |
|
25 derajat |
5 menit |
|
42 derajat |
15~30 menit |
|
85 derajat |
5 s |
Catatan
1. Harap kenakan sarung tangan sekali pakai selama pengoperasian untuk menghindari kontaminasi RNase.
2. Pastikan untuk meletakkan komponen G3329-1, G3329-2 dan G3329-4 di atas es.
1. Komponen seperti G3329-1, G3329-2 dan G3329-4 mengandung gliserol konsentrasi tinggi dan harus disentrifugasi sebentar sebelum digunakan.
3. Untuk templat GC tinggi atau templat kompleks, templat RNA, air bebas nuklease dapat dicampur terlebih dahulu dan ditahan pada suhu 65 derajat selama 5 menit, kemudian didinginkan dengan cepat di atas es. Kemudian tambahkan komponen reaksi lainnya.
4. Untuk kontrol negatif, hanya perlu mengganti G3329-1 dengan volume yang sama dengan G3329-4 dalam sistem reaksi.
5. Produk transkripsi balik dapat dipertahankan pada suhu -20 untuk waktu yang singkat. Jika pengawetan jangka panjang diperlukan, disarankan agar produk disimpan pada suhu-80 derajat setelah sub-kemasan, untuk menghindari pembekuan dan pencairan berulang kali.
6. Jika primer qPCR berikutnya dirancang melintasi ekson, langkah-langkah penghapusan genom dapat dihilangkan.
Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!
Tag populer: swescript all-in-one blue rt supermix untuk qpcr (penghapus gdna satu langkah), Cina produsen, pemasok, pabrik swescript all-in-one blue rt supermix untuk qpcr (penghapus gdna satu langkah)
