SweMagrose Protein Manik Magnetik yang Dimurnikan Antibodi

Protein A merupakan protein permukaan dinding sel yang terdapat pada Staphylococcus aureus dengan berat molekul 42kDa. Protein A dan Protein G secara fungsional serupa dan dapat berikatan khusus dengan imunoglobulin mamalia (Ig). Protein A dan G rekombinan dengan modifikasi yang sesuai terikat pada manik-manik magnetik dapat digunakan untuk imunopresipitasi atau pemurnian antibodi. Manik-manik magnetik Protein A cocok untuk imunopresipitasi IgG1 manusia, IgG2, IgG4, IgG2a tikus, IgG2b, sedangkan manik-manik magnetik Protein G cocok untuk imunopresipitasi IgG1 manusia, IgG2, IgG3, IgG4, IgG1 tikus, IgG2a, IgG2b, IgG3 , IgG1 tikus, IgG2a, IgG2b, antibodi poliklonal IgG2c. (Lihat Tabel I untuk informasi spesifik)

Produk ini mengadopsi manik-manik magnetik berlabel protein Protein A yang dikembangkan dan diproduksi sendiri, dibandingkan dengan produk serupa di pasaran, produk ini mengikat antibodi dengan lebih efisien dan memiliki tingkat pengikatan non-spesifik yang lebih rendah, bersama dengan buffer yang dioptimalkan, dapat nyaman dan efisien untuk eksperimen imunopresipitasi; ini dapat digunakan secara luas dalam isolasi dan pemurnian protein target dalam sampel seperti lisat sel, supernatan sekresi seluler, serum, asites, dll.

Kirim dengan es basah; Simpan pada suhu 2-8 , berlaku selama 12 bulan.

Formulasi reagen terkait pemurnian antibodi mengacu pada berikut ini, pengguna dapat disesuaikan sesuai dengan kondisi eksperimen tertentu.

Prosedur manual (pemurnian IgG asites tikus sebagai contoh)

1. Pemrosesan sampel: ambil 500 μL sampel asites, tambahkan buffer pencuci pengikat untuk membuat 500 μL, jika ada lebih banyak endapan protein dalam sampel, sentrifugasi supernatan untuk percobaan, yang dapat meningkatkan kemurnian antibodi.

2. Pretreatment manik magnetik: Vortex manik magnetik yang telah dimurnikan antibodi selama 30 detik hingga tersuspensi kembali secukupnya, ambil 100 μL 50% (v/v) SweMagrose Protein A Antibody Purified Magnetic Beads ke dalam tabung EP 1,5 mL baru lainnya, aspirasi secara magnetis dan buang supernatannya, cuci dengan 1 mL buffer pencuci pengikat sebanyak dua kali, kemudian ambil supernatannya setelah diaspirasi secara magnetis.

Catatan: Jumlah manik-manik dapat disesuaikan dengan jumlah antibodi dalam sampel.

3. Adsorpsi antibodi: tambahkan sampel yang diproses pada langkah 1 ke manik-manik magnetik pada langkah 2, vorteks dan aduk rata, masukkan tabung EP ke dalam mixer putar atau putar tabung secara manual secara perlahan pada suhu kamar (sekitar 25 derajat) untuk membuat manik-manik magnetik bersentuhan penuh dengan sampel, balikkan selama 15 menit, letakkan di rak pemisah magnetik selama 30 detik, lalu buang supernatannya.

4. Pencucian manik magnetik: tambahkan 1 mL buffer pencuci pengikat ke dalam tabung EP, resuspensi dengan pengocokan dan kemudian serap secara magnetis selama 30 detik. Buang supernatannya dan ulangi operasi sebanyak 3 kali.

5. Elusi antibodi: Tambahkan 0.5~1.0 mL eluen ke dalam tabung EP dengan butiran magnet dicuci seperti dijelaskan di atas, dan resuspensi tabung secara cepat dengan memipet atau memvorteks, lalu perlahan-lahan balikkan tabung dalam mixer turnover atau dengan tangan pada suhu kamar (sekitar 25 derajat), pisahkan tabung dengan penghisapan magnetis setelah dibalik selama 10 menit, dan kemudian kumpulkan supernatan ke dalam tabung EP baru.

6. Netralisasi antibodi: tambahkan sejumlah larutan netralisasi ke dalam eluat antibodi pada langkah 5, umumnya 1/10 volume elusi antibodi (misalnya, jika eluat antibodi adalah 500 μL, jumlah larutan netralisasi yang ditambahkan adalah 50 μL) , sehingga nilai pH antibodi yang dielusi dipertahankan dalam lingkungan netral, yang kondusif untuk pemeliharaan aktivitas biologis antibodi dan menghindari inaktivasi antibodi.

7. Pasca perawatan manik-manik magnetik: Cuci manik-manik dua kali dengan larutan elusi setelah digunakan, pisahkan secara magnetis, dan buang supernatannya; kemudian cuci tiga kali dengan larutan pencuci yang mengikat, pisahkan secara magnetis, dan buang supernatannya; suspensikan kembali manik-manik dengan 200 µL larutan pengawet, lalu simpan pada suhu 2~8 derajat.

1. Harap baca petunjuk ini dengan cermat sebelum melanjutkan dengan pemurnian antibodi.

2. Jangan membekukan atau mensentrifugasi manik-manik karena dapat menyebabkan pengumpulan manik-manik yang tidak dapat diubah.

3. Pengoperasian manual memerlukan penggunaan bingkai pemisah magnetik.

Tabel 1

Untuk penggunaan penelitian saja. Tidak untuk digunakan dalam prosedur diagnostik atau terapeutik!

Tag populer: protein swemagrose sebuah manik-manik magnetik yang dimurnikan antibodi, Cina protein swemagrose sebuah manik-manik magnetik yang dimurnikan antibodi produsen, pemasok, pabrik