JIKA750-Tiramida

Amplifikasi sinyal tyramide (TSA) adalah jenis metode deteksi enzimatik yang menggunakan HRP untuk melakukan pelabelan antigen target di tempat dengan kepadatan tinggi dan dapat diterapkan untuk amplifikasi sinyal IF/IHC. Prinsip utama teknologi TSA: Dengan adanya hidrogen peroksida H2O2, HRP peroksidase lobak dapat mengkatalisis tyramine sebagai zat antara yang sangat aktif dan berumur pendek. Dalam waktu singkat, zat antara dapat berikatan secara kovalen dengan permukaan protein di sekitarnya yang kaya elektron untuk membentuk kompleks tiramin, dan sejumlah besar gugus kaya seperti "pulau" terintegrasi dengan enzim sebagai pusatnya. Sejumlah besar luciferin disimpan di situs pengikatan antigen-antibodi untuk mencapai amplifikasi sinyal.

Teknik TSA dapat digunakan untuk mendeteksi target dengan kelimpahan rendah yang tidak dapat dideteksi dengan metode konvensional. Teknologi amplifikasi sinyal berdasarkan tyramine dapat memberikan sensitivitas yang sangat tinggi dan mendeteksi antigen target dalam jumlah yang sangat kecil. Teknologi TSA sangat mengurangi jumlah antibodi dan menghemat antibodi, dan dapat digunakan dalam kombinasi dengan metode pewarnaan konvensional untuk pencitraan multi-warna, atau dua atau lebih reaksi tyramine dapat dilakukan secara berurutan untuk memberi label target yang berbeda pada sampel, sehingga pewarnaan fluoresensi ganda dapat dicapai dengan pelabelan berulang pada tiramin fluoresen yang berbeda

Kondisi Penyimpanan dan Penanganan

Kompres es basah untuk transportasi, simpan pada suhu -20 derajat selama 12 bulan.

Catatan:

1. Setelah meleleh pada suhu kamar, tabung disentrifugasi sebentar sebelum digunakan.

2. Dibandingkan dengan antibodi sekunder fluoresen, kit TSA memiliki sensitivitas lebih tinggi dan sinyal lebih kuat. Oleh karena itu, konsentrasi antibodi primer harus dikurangi, umumnya meningkat 5-10 kali berdasarkan rasio pengenceran yang direkomendasikan dalam manual antibodi untuk mengurangi fluoresensi latar belakang yang disebabkan oleh pengikatan non-spesifik. Disarankan untuk mengatur konsentrasi gradien resistensi untuk hasil terbaik.

3. Jika fluoresensi latar belakang kuat, disarankan untuk meningkatkan langkah pendinginan autofluoresensi jaringan.

4. Rasio pengenceran yang disarankan untuk Tyramide fluoresen adalah 1:500, dan rasio pengenceran dapat disesuaikan berdasarkan hasil eksperimen (kisaran rasio pengenceran yang disarankan adalah 1:200-1:1000).

5. Pengencer harus disiapkan sendiri, 1×TBST (direkomendasikan G0004) yang mengandung 0,003% H2O2. 1×TBST (disarankan G0004) 100 mL, tambahkan 100 μL 3% H2O2, aduk rata. Pengencernya mudah rusak, jadi disarankan untuk menggunakannya sekarang.

6. Jika pelabelan fluoresen ganda dilakukan, disarankan untuk menginkubasi antibodi poliklonal terlebih dahulu, baru kemudian antibodi monoklonal. Antibodi yang sesuai dengan protein target dengan kelimpahan tinggi diinkubasi terlebih dahulu, dan kemudian antibodi yang sesuai dengan protein target dengan kelimpahan rendah diinkubasi. Untuk langkah pengoperasian spesifik, lihat kit pewarnaan multi-label TSAPLus neon (1-7 label, 2-8 fluoresensi warna) kami (G1226, G1236, G1255, G1256, G1257, G1259).

7. Kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai selama pengoperasian.

8. Menurut peta sumber cahaya dari sistem pencitraan fluoresensi, kombinasi pewarna fluoresen yang berbeda dapat dipilih untuk melakukan multi-pelabelan fluoresensi TSA.

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

Tag populer: if750-tyramide, Cina jika750-produsen, pemasok, pabrik tyramide