Kit Ekstraksi DNA/RNA Virus

 

Nama Produk	Kucing.Tidak.	Spesifikasi.
Kit Ekstraksi DNA/RNA Virus	G3647-50T	50T

 

 

Kit ini dirancang untuk isolasi cepat berbagai DNA/RNA virus dari serum, plasma, urin, supernatan media kultur sel, stok virus, dan jaringan yang terinfeksi. Dengan memanfaatkan karakteristik kolom adsorpsi asam nukleat yang berikatan secara reversibel dengan asam nukleat, ditambah dengan sistem buffer khusus, asam nukleat dibiarkan berikatan khusus dengan matriks membran, dan protein, fragmen sel, dan polutan lainnya dibilas secara efektif. dan terakhir asam nukleat dielusi dari kolom adsorpsi dengan Air Bebas Nuklease. DNA/RNA berkualitas tinggi yang diperoleh dapat langsung digunakan dalam PCR hilir, sintesis cDNA, RT-qPCR, dan eksperimen biologi molekuler lainnya.

 

 

Proteinase K dan Carrier RNA dikirimkan bersama es basah dan disimpan pada suhu -20 derajat . Reagen lainnya dikirim dan disimpan pada suhu kamar; berlaku hingga 1 tahun.

 

 

Nomor Komponen	Komponen	G3647-50T
G3647-1	PenyanggaVLB	10 ml
G3647-2	Proteinase K	1 ml
G3647-3	RNA pembawa	150 μL
G3647-4	PenyanggaVWA	12 ml
G3647-5	Penyangga VWB	15ml
G3647-6	Air Bebas Nuklir	12 ml
G3647-7	Putar Kolom dengan tabung Koleksi	50
petunjuk		Satu salinan

 

 

1. Jika BufferVLB dan BufferVWA mengendap, harap panaskan pada suhu 37 derajat dan gunakan saat sudah dikembalikan ke suhu kamar.

2. Tambahkan 18 mL etanol anhidrat ke dalam BufferVWA dan 60 mL etanol anhidrat ke dalam BufferVWB sebelum digunakan pertama kali.

3. RNA pembawa dapat dikemas dalam sub-kemasan dan disimpan pada suhu -20 sebelum digunakan pertama kali, dan pembekuan serta pencairan berulang kali harus dihindari.

4. Harap dinginkan penggiling terlebih dahulu jika menggiling jaringan dengan penggiling.

 

 

1. Persiapan sampel:

A. Lisis serum, plasma, urin, supernatan media kultur sel dan stok virus: Pengambilan sampel 10-200 μL serum, plasma, urin, supernatan kultur sel atau stok virus. Jumlah awal yang kurang dari 200 μL dapat diisi ulang menjadi 200 μL dengan PBS atau Air Bebas Nuklease.

B. Lisis jaringan yang terinfeksi: Tempatkan 10~20 mg jaringan terinfeksi segar atau kriopreservasi ke dalam 1,5 mL tabung sentrifugasi bebas nuklease yang berisi 2~3 buah butiran gerinda berukuran 3 mm (disarankan G0203) atau gunakan tabung gerinda khusus (disarankan HT-200- M). Segera masukkan tabung centrifuge atau tabung penggilingan yang berisi jaringan ke dalam nitrogen cair, lalu giling jaringan secara menyeluruh hingga homogen pada suhu rendah menggunakan penggiling jaringan (disarankan KZ-5F-3D, jika jaringan tidak terhomogenisasi secara menyeluruh, hasil dan kualitas DNA/RNA akan terpengaruh). Tambahkan 200 μL PBS atau Air Bebas Nuklease setelah digiling.

2. Tambahkan 200 μL BufferVLB, 20 μL Proteinase K dan 3 μL Carrier RNA. Setelah tercampur rata, inkubasi pada suhu 56 derajat selama 10 menit.

3. Tambahkan 200 μL etanol anhidrat, aduk terbalik.

4. Pindahkan larutan dari langkah sebelumnya ke Spin Column, sentrifugasi dengan kecepatan 12,000 rpm selama 1 menit, dan buang filtratnya dari tabung Pengumpul.

5. Tambahkan 500 μL Buffer VWA ke dalam Spin Column, sentrifugasi dengan kecepatan 12,000 rpm selama 1 menit, dan buang filtratnya dari tabung Pengumpul.

6. Tambahkan 700 μL Buffer VWB pada Spin Column (silahkan tambahkan Buffer VWB disepanjang dinding pipa Spin Column untuk membantu membilas sisa garam pada dinding pipa). centrifuge pada 12,000 rpm selama 30 detik, dan buang filtratnya.

7. Ulangi langkah6.

8. Letakkan Spin Column pada tabung Pengumpul, sentrifugasi dengan kecepatan 12,000 rpm selama 2 menit.

9. Pindahkan Spin Column ke dalam tabung centrifuge 1,5 mL bebas Nuklease yang baru, buka tutupnya selama 3~5 menit pada suhu kamar, sehingga sisa etanol Spin Column dapat menguap sepenuhnya.

10. Tambahkan 30~50 μL Air Bebas Nuklease ke dalam tabung sentrifugal, diamkan pada suhu kamar selama 5 menit, sentrifugasi pada kecepatan 12,000 rpm selama 2 menit pada suhu kamar untuk mengumpulkan larutan RNA. Untuk mendapatkan konsentrasi RNA yang lebih tinggi, Anda juga dapat menambahkan kembali eluen pertama ke Kolom Putar RNA, kemudian didiamkan pada suhu kamar selama 5 menit dan disentrifugasi selama 2 menit untuk mengumpulkan RNA kembali.

 

 

1. Harap baca Manual Produk dengan seksama sebelum digunakan.

2. Karena adanya penambahan Carrier RNA pada proses ekstraksi, kuantitasnya tidak dapat ditentukan dengan elektroforesis atau absorptometer.

3. RNA Pembawa yang disediakan oleh kit ini adalah RNA dari E. coli, yang tujuan utamanya adalah untuk meningkatkan efisiensi pemulihan asam nukleat jejak dan mencegah degradasi jejak RNA. Jika primer PCR memiliki homologi yang tinggi dengan Carrier RNA, maka primer tersebut dapat didesain ulang.

4. Sebelum elusi, etanol harus diuapkan seluruhnya untuk menghindari pengaruh sisa etanol pada percobaan hilir.

5. Jangan mengeringkan dalam waktu lama, agar tidak mempengaruhi efisiensi elusi asam nukleat.

6. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, mohon kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai.

 

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

 

 

Tag populer: kit ekstraksi virus dna/rna, produsen, pemasok, pabrik kit ekstraksi virus dna/rna