Kit Deteksi Mikoplasma （Bercahaya）

Kit pendeteksi mikoplasma ini dirancang dengan menggunakan aktivitas enzim spesifik dalam Mycoplasma. Enzim ini dapat menguraikan substrat spesifik dalam reagen pendeteksi mikoplasma dan mengubah ADP menjadi ATP. Luciferase mengkatalisis oksidasi luciferin dengan adanya ATP untuk menghasilkan fluoresensi biologis. Hal ini dapat ditentukan dengan instrumen chemiluminescence untuk mencerminkan apakah sampel yang akan diuji terkontaminasi oleh mikoplasma. Seluruh proses pendeteksiannya sederhana, hanya memerlukan dua langkah, dan memakan waktu sekitar 15 menit. Metode ini memiliki sensitivitas tinggi dan mendeteksi Mycoplasma dengan aktivitas biologis nyata, sehingga hasil deteksi lebih akurat dibandingkan PCR.

Kirim dengan es basah; Disimpan pada suhu -20 , Reagen Deteksi Mycoplasma A harus dijauhkan dari cahaya, berlaku selama 12 bulan.

1. Ambil supernatan sel dalam jumlah yang sesuai (1 ml sudah cukup) yang dikultur selama 3-6 hari, sentrifugasi 400 g selama 3 menit untuk menghilangkan sejumlah kecil sel mengambang atau kotoran. Ambil supernatannya dan segera uji, atau simpan pada suhu 4 derajat selama satu minggu, atau -80 derajat selama setengah tahun;

2. Seimbangkan semua reagen uji dan sampel uji dengan suhu kamar, dan suhu yang paling sesuai adalah 20-25 derajat;

3. Tambahkan 50 μL sampel yang akan diuji, kontrol negatif (misalnya, air steril atau PBS) ke dalam pelat sumur 96-(pelat tidak transparan, disarankan menggunakan pelat putih sumur 96-khusus );

4. Tambahkan 50μL Reagen Deteksi Mycoplasma A, aduk perlahan, jangan menghasilkan gelembung, dan jauhkan dari cahaya pada suhu kamar (20-25 derajat ) selama 5 menit. Kemudian deteksi chemiluminescence dilakukan dengan penanda enzim dengan deteksi chemiluminescence, dan pembacaan meterannya adalah A. (Harap sesuaikan parameter yang sesuai sesuai dengan sensitivitas instrumen, dan waktu deteksi setiap sumur umumnya 0.{ {5}} dtk);

5. Tambahkan 50μL reagen pendeteksi mikoplasma B, aduk perlahan, jangan menghasilkan gelembung, dan jauhkan dari cahaya pada suhu kamar (20-25 derajat ) selama 10 menit. Kemudian dilakukan deteksi chemiluminescence dengan penanda enzim dengan deteksi chemiluminescence, dan pembacaan meterannya adalah B. (Catatan: harap uji secara ketat sesuai dengan 10 menit setelah menambahkan reagen uji Mycoplasma B. Sebaiknya tidak dilakukan terlebih dahulu atau ditunda, jika tidak maka akan mempengaruhi penilaian hasil);

6. Hitung rasio=nilai baca A/ nilai baca B.

A. If B/A>1.1, menunjukkan adanya kontaminasi mikoplasma pada kultur sel;

B.Jika B/A<0.9, there is no mycoplasma contamination in the cell culture;

7. Jika rasio B/A antara 0.9-1.1, disarankan untuk melanjutkan kultur sel selama 24-48 jam, lalu mengujinya kembali untuk mengetahui apakah terdapat mikoplasma kontaminasi. Jika rasio b/a masih antara 0.9-1.1, maka kultur sel tidak terkontaminasi Mycoplasma dan negatif Mycoplasma.

1. Reagen pendeteksi mikoplasma A mengandung luciferase, yang akan dinonaktifkan secara bertahap dengan pembekuan dan pencairan berulang kali. Disarankan agar sub-paket tersebut dikemas dengan benar dan disimpan setelah pencairan pertama, dan wadah sub-paket harus bersih dan bebas polusi.

2. Penggunaan pelat sumur 96-putih atau hitam buram sangat disarankan untuk pengujian, karena penggunaan pelat sumur 96-transparan biasa dapat menyebabkan gangguan pada sumur di sekitarnya.

3. Permukaan kulit manusia kaya akan ATP. Harap kenakan sarung tangan dan masker eksperimental saat pengujian. Bahan habis pakai lainnya juga harus bersih dan bebas polusi untuk mencegah polusi ATP dari sumber eksternal.

4. Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan pakaian eksperimental dan sarung tangan sekali pakai.

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

Tag populer: kit deteksi mikoplasma （luminescent）, produsen, pemasok, pabrik kit deteksi mikoplasma （luminescent）