Solusi Pewarnaan Hoechst 33258 (Siap Digunakan)

Rumus molekul Hoechst 33258 adalah C25H24N6O·3HCl, berat molekul 533,88, dan nomor CAS adalah 23491-45-4. Hoechst 33258 adalah pewarna fluoresen biru yang dapat menembus membran sel, dan fluoresensinya meningkat secara signifikan bila dikombinasikan dengan DNA untai ganda. Panjang gelombang eksitasi maksimum adalah 346 nm, dan panjang gelombang emisi maksimum adalah 460 nm. Hoechst 33258 umumnya digunakan untuk deteksi apoptosis, pewarnaan nuklir, atau pewarnaan DNA rutin. Ini dapat digunakan untuk mewarnai inti sel dan jaringan yang tetap atau sel dan jaringan yang tidak tetap. Setelah pewarnaan, dapat diamati dengan mikroskop fluoresensi atau dideteksi dengan flow cytometry. Jika diamati dengan mikroskop fluoresensi, ia tereksitasi oleh sinar ultraviolet, yaitu fluoresensi biru.

Produk ini merupakan larutan siap pakai yang konsentrasinya dioptimalkan untuk memenuhi kebutuhan segala jenis pewarnaan rutin.

Transportasi es basah; Simpan pada suhu 2-8 derajat dari cahaya, berlaku selama 6 bulan.

1. Untuk bagian sel atau jaringan tetap:

A. Untuk sampel sel atau jaringan yang terfiksasi, keluarkan larutan pengikat setelah fiksasi, dan cuci dengan PBS atau buffer lain yang sesuai 2-3 kali, 3-5 mnt setiap kali (untuk mendeteksi sel yang tersuspensi, ikuti prosedur rutin metode pengoperasian sel tersuspensi, dan sentrifugasi serta langkah-langkah lainnya harus ditambahkan dalam semua percobaan);

B. (Langkah opsional) Jika sel atau jaringan yang terfiksasi perlu diobati dengan pewarnaan imunofluoresensi, pengobatan yang relevan harus dilakukan terlebih dahulu, dan kemudian pewarnaan Hoechst 33258 harus dilakukan setelah perawatan;

C. Ambil langsung larutan pewarna produk Hoechst 33258 (tipe siap pakai) dalam jumlah yang sesuai untuk menutupi sampel, dan inkubasi pada suhu kamar selama sekitar 5 menit dalam gelap;

D. Hapus larutan pewarna dan cuci dengan PBS atau buffer lain yang sesuai 2-3 kali, 3-5 menit setiap kali;

e. Setelah pelat disegel atau langsung ditempatkan di bawah mikroskop fluoresensi, panjang gelombang eksitasi adalah 350 nm, dan panjang gelombang emisi adalah 460 nm.

2. Untuk sel hidup atau jaringan yang dikultur:

A. Tambahkan larutan pewarna Hoechst 33258 (tipe siap pakai) dalam jumlah yang sesuai ke dalam kultur sel untuk menutupi seluruh sampel yang akan diwarnai; umumnya, 1 mL larutan pewarna harus ditambahkan ke dalam lubang pelat sumur 6-, dan 100 μL larutan pewarna harus ditambahkan ke dalam lubang pelat sumur 96-. Sampel diinkubasi selama 10-20 menit dalam inkubator pada suhu 37 derajat.

B. Hapus larutan pewarna dan cuci dengan PBS atau buffer lain yang sesuai 2-3 kali, 3-5 menit setiap kali;

C. Diamati langsung di bawah mikroskop fluoresensi, panjang gelombang eksitasi adalah 350 nm, dan panjang gelombang emisi 460 nm.

Catatan:

1. Semua pewarna fluoresen memiliki masalah pendinginan fluoresensi. Disarankan untuk mengambil foto sesegera mungkin setelah pewarnaan. Untuk memperlambat pemadaman fluoresensi, sealer pemadaman fluoresensi (disarankan G1401) dapat digunakan.

2. Kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai selama pengoperasian.

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

Tag populer: larutan pewarnaan hoechst 33258 (siap pakai), produsen, pemasok, pabrik larutan pewarnaan hoechst 33258 (siap pakai)