Kolom Kromatografi Untuk Memisahkan Eksosom (Supernatan Sel)

 

Nama Produk	Kucing. TIDAK.	Spesifikasi.
Kolom Kromatografi untuk Memisahkan Eksosom (Supernatan Sel)	G4113-5	5 buah

 

 

Eksosom adalah vesikel membran berskala nano dengan ukuran seragam dan ukuran partikel 30 - 150 nm yang secara aktif disekresikan ke ruang ekstraseluler oleh sel. Vesikel ini memiliki penanda spesifiknya sendiri, dan dilapisi dengan protein, mRNA, miRNA, lipid, dan zat lainnya, yang dapat digunakan sebagai jalur komunikasi zat dan sinyal antar sel dan berpartisipasi dalam proses seperti pertumbuhan sel, proliferasi sel, diferensiasi sel, migrasi sel, angiogenesis, dan pertumbuhan tumor.

Produk ini adalah kolom kromatografi eksklusi ukuran (SEC) yang cocok untuk pemisahan cepat dan pemurnian eksosom dari supernatan sel. Produk ini menggunakan zat konsentrasi supernatan sel untuk memisahkan dan memperkaya eksosom supernatan sel, dan kemudian menggunakan kolom kromatografi pemisahan vesikel ekstraseluler untuk memurnikan eksosom pekat. Yang tidak hanya dapat mempertahankan eksosom dengan kemurnian tinggi dan aktivitas tinggi, tetapi juga menghilangkan protein secara efisien; Secara efektif menghindari kerusakan pada struktur membran ekstraseluler yang disebabkan oleh gaya sentrifugal sangat tinggi dalam metode sentrifugasi kecepatan sangat tinggi, dan mengurangi pengaruh protein konsentrasi tinggi dan zat lain terhadap kemurnian eksosom dalam metode pengendapan tradisional.

 

 

Transportasi pada suhu kamar; Simpan pada suhu ruangan dengan masa berlaku 12 bulan.

 

 

Nomor Komponen	Komponen	G4113-5
G4113-1	Kolom Kromatografi untuk Memisahkan Eksosom (Supernatan Sel)	5 buah
G4113-2	Konsentrat supernatan sel	250mL
Panduan Produk		1 buah

 

 

1. Konsentrasi supernatan sel

a) Sampel biologis supernatan sel disaring dengan membran filter 0.22 μM dan dimurnikan terlebih dahulu untuk digunakan;

b) Campurkan sampel biologis supernatan sel dan konsentrat supernatan sel dalam volume yang sama, kocok kuat-kuat selama 15 detik, dan diamkan selama 2 jam dalam lemari es pada suhu 4 derajat;

c) Tempatkan campuran dalam centrifuge pada suhu 4 derajat pada 10.000 × g selama 60 menit; Buang supernatannya;

d) 1 × buffer PBS sebanyak 5% volume sampel biologis supernatan sel ditambahkan ke presipitasi sentrifugasi resuspensi penuh;

e) Suspensi berat kaya akan eksosom, yang dapat digunakan untuk eksperimen selanjutnya atau dibekukan pada suhu -80 derajat untuk cadangan.

2. Persiapan pemurnian eksosom

a) Siapkan larutan buffer steril pada suhu ruangan, seperti PBS (direkomendasikan G4202);

b) siapkan suhu ruangan, reagen steril 0.1M NaOH dan etanol 20%;

c) Sebelum menggunakan kolom pemisah, lepaskan penutup atas berwarna merah dari kolom pemisah dan letakkan pada braket (direkomendasikan G6063) untuk digunakan;

3. Pemisahan eksosom

a) Siapkan sampel eksosom setelah pemekatan dan resuspensi konsentrat supernatan sel untuk digunakan nanti;

b) Lepaskan penutup bawah putih kolom pemisah, dan setelah cairan pelindung di dalam kolom mengalir keluar, tambahkan total 30 mL larutan buffer secara bertahap untuk membersihkan kolom pemisah;

c) Setelah semua buffer di atas pelat ayakan masuk ke kolom pemisah; Ambil {{0}}.5mL sampel eksosom cadangan dari langkah 3.a) dan tambahkan ke tengah pelat ayakan (jika kurang dari 0.5mL, tambahkan larutan buffer untuk membuat hingga 0,5mL);

d) Setelah semua sampel eksosom melewati pelat ayakan dan masuk ke kolom pemisah, tambahkan larutan buffer 2,5mL;

e) Setelah semua larutan buffer pada langkah sebelumnya melewati pelat ayakan dan masuk ke kolom pemisah, tambahkan 1mL larutan buffer, sekaligus kumpulkan 1mL larutan pencuci yang kaya akan eksosom aktif alami; Ini dapat diterapkan untuk eksperimen berikutnya atau dibekukan pada suhu -80 untuk cadangan;

4. Perawatan pasca pemisahan

a) Setelah pemisahan eksosom selesai, tambahkan total 30 mL larutan buffer secara bertahap untuk membersihkan kolom pemisahan;

b) Jika perlu untuk terus menggunakan kolom pemisahan untuk memisahkan eksosom dari supernatan sel, ulangi langkah 3.c) hingga 3.e);

c) Jika tidak perlu melanjutkan penggunaan kolom pemisah untuk memisahkan eksosom dari supernatan sel, pertama-tama tambahkan 5 mL 0.1M NaOH untuk membersihkan kolom pemisahan, lalu tambahkan total 20 mL larutan buffer secara bertahap untuk membersihkan dan menyeimbangkan kolom pemisahan, lalu tambahkan 5 mL etanol 20% untuk membersihkan kolom pemisahan. Setelah dibersihkan, tutupi penutup bawah putih kolom pemisah; Terakhir, tambahkan 2mL etanol 20% untuk melembabkan, menutupi dan mengencangkan bagian atas kolom pemisah yang berwarna merah, dan menyimpan kolom pemisah pada suhu kamar.

 

 

1. Saat memisahkan eksosom dari supernatan sel yang berbeda menggunakan produk ini, kurva elusi dan kemurniannya sedikit berbeda, namun tidak mempengaruhi tren keseluruhan.

2. Selama proses pemisahan eksosom supernatan sel dari produk ini, perlu untuk menghindari gangguan aliran cairan yang berkepanjangan di kolom pemisahan.

3. Selama penggunaan produk ini, jangan pisahkan sampel biologis dari sumber berbeda pada kolom yang sama, dan jangan menggunakan kembali kolom yang sama lebih dari 5 kali.

4. Produk ini cocok untuk penyimpanan dan penggunaan pada suhu kamar, dan penggunaan suhu rendah dan pemanasan suhu tinggi harus dihindari.

5. Selama percobaan, harap kenakan pakaian lab dan sarung tangan sekali pakai untuk menghindari kontaminasi dan menjamin keamanan.

 

Hanya Untuk Penggunaan Penelitian!

 

 

Tag populer: kolom kromatografi untuk memisahkan eksosom (supernatan sel), kolom kromatografi Cina untuk memisahkan eksosom (supernatan sel) produsen, pemasok, pabrik